Cara Mengawal Pencemaran Makmal Perubatan

Dalam makmal perubatan, risiko pencemaran kultur sel tidak dapat diukur—tidak kira betapa berhati-hatinya kerja itu. Kesilapan pengiraan risiko sememangnya tidak pernah didengari, dan pencemaran sering mengakibatkan kehilangan budaya. Oleh itu, dalam blog ini, kami ingin menjelaskan cara mengesan dan mengelakkan pencemaran dalam talian sel secara sistematik.

Setiap makmal perubatan berada di bawah ancaman hari demi hari
Pencemaran mikrob dalam kultur sel—termasuk yang dibeli daripada pihak ketiga—bukan perkara biasa di makmal. Malah, sebaliknya adalah benar: Banyak garisan sel yang tumbuh di makmal dijangkiti mycoplasma. Spora kulat kecil bersembunyi di mana-mana dan boleh dibawa ke udara. Sudah tentu, apabila bekerja dalam persekitaran yang steril, terdapat ruang untuk kesilapan manusia. Mudah untuk melakukan kesilapan.

Senario ngeri dalam makmal kultur sel - pelbagai jenis pencemaran: Pencemaran
mikrob (bakteria, mikoplasma, kulat, yis, dll.)
Pencemaran virus Pencemaran
protein (prion)
Pencemaran kimia (boleh larut larut dan boleh diekstrak daripada plastik, logam berat, dsb.)
Silang- pencemaran dengan kultur sel lain
Dari manakah datangnya pencemaran?
1. Sejauh manakah "bersih" budaya primitif?

Masalah biasanya bermula dengan bahan asal. Walaupun dengan usaha terbaik dalam penghasilan media, sesetengah bahan tidak boleh steril sepenuhnya. Oleh itu, sentiasa ada risiko mycoplasma tergelincir melalui penapis steril. Prion juga boleh bertahan dalam pensterilan wap pada suhu 121 °C.

2. Adakah makmal kerja benar-benar persekitaran yang steril?

Salah satu punca utama pencemaran makmal ialah tubuh manusia. Contohnya, banyak pencemaran silang boleh dielakkan jika juruteknik makmal mengelak daripada bekerja pada berbilang barisan pengeluaran pada masa yang sama di atas bangku steril. Satu budaya dengan cepat boleh menjangkiti yang lain jika cecair tidak dikendalikan dengan betul.

Juga, tergesa-gesa adalah musuh terburuk kerja steril. Pintu inkubator CO2 tidak boleh dibiarkan terbuka tanpa sebab, sudah tentu tidak untuk jangka masa yang lama. Juruteknik makmal hendaklah hanya bekerja pada satu talian sel pada satu masa, tidak kira berapa banyak tekanan masa yang mereka hadapi. Apabila membuka pembungkusan pipet sekali pakai di bawah bangku, setelah penutup dibuka, penutup mesti diketepikan - kata kunci: Amalan Makmal Baik (GLP).
Untuk maklumat lanjut, baca catatan blog kami: "Lima aplikasi menarik untuk inkubator CO2".

3. Adakah anda menggunakan peralatan makmal yang betul?

Sudah tentu, sangat mungkin bahawa peralatan yang digunakan dalam makmal perubatan boleh membawa kepada pencemaran kultur sel. Oleh itu, kami mengesyorkan:

Gunakan bekas plastik tanpa pemplastik
Pilih lokasi inkubator acuan yang betul (lokasi berhampiran sinki boleh menyebabkan pencemaran sabun)
Gunakan aksesori inkubator yang diperbuat daripada kuprum biosid
Apabila antibiotik digunakan, strain bebas antibiotik hendaklah ditanam dari semasa ke semasa. . (Ini kerana antibiotik menutupi pencemaran, dan jangkitan boleh merebak.)
Apakah kaedah penyiasatan yang boleh digunakan untuk mengesan jangkitan yang mana?
Perkara yang paling berbahaya mengenai jangkitan mycoplasma ialah ia sering tidak dapat dikesan untuk jangka masa yang lama. Pada dasarnya, kejadian pencemaran boleh dikawal dan dijejaki dalam pelbagai cara, sesetengah daripadanya sangat kompleks dan yang lain kurang begitu.

Juruteknik makmal yang berpengalaman boleh mengetahui sama ada pencemaran silang telah berlaku hanya dengan melihat melalui mikroskop.
Jika kita mengekstrak semua DNA daripada kultur sel, kandungan DNA mikoplasmanya boleh dikesan menggunakan kaedah PCR.
Makmal yang menjalankan transduksi virus atau bioassay juga harus memeriksa pencemaran virus.
Makmal yang mengeluarkan ubat untuk rawatan baru harus memeriksa bakteria, spora, kulat, mikoplasma, HIV, HCV dan BSE berisiko rendah.
Bagaimanakah pencemaran harus dikendalikan?
Setiap kejadian pencemaran mesti direkodkan dan digredkan. Jika tidak ada yang lain, makmal perubatan yang menyembunyikan masalah pencemaran mereka di bawah permaidani meletakkan reputasi baik mereka pada risiko.

Sudah tentu, sekiranya berlaku pencemaran, langkah-langkah pembersihan khas juga mesti diambil: dalam kes jangkitan kulat, adalah dinasihatkan untuk memeriksa sama ada makmal sentiasa dibasmi kuman dengan reagen berasaskan alkohol
Sebagai peraturan umum, pembasmian semburan biasa atau lap-disinfeksi bahagian dalam inkubator dengan reagen berasaskan alkohol akan membantu mengelakkan pencemaran
Pembasmian kuman udara panas bulanan adalah amalan perubatan standard di kebanyakan makmal
Dalam kes sel stem yang sensitif, saluran sel yang dijangkiti hanya boleh dirawat dengan antibiotik dalam kes yang jarang berlaku. Dalam kebanyakan kes, penyelesaiannya mahal - budaya perlu dibuang dan kerja harus bermula dari awal.

Kesimpulannya:
Mampu mengesan, mengesahkan dan menangani pencemaran secara konsisten adalah satu kemestian, terutamanya dalam makmal perubatan yang menggunakan sel stem yang sangat sensitif dan tidak menggunakan antibiotik. Pemantauan telus adalah kritikal. Menutup pencemaran atau membiarkannya merebak hanya meningkatkan bahaya dan tidak perlu. Inkubator hendaklah sentiasa menjadi komponen paling selamat sepanjang langkah proses; jika sampel tercemar, dalam kebanyakan kes ini berlaku di hulu atau hilir kultur inkubator.

Mengikut julat kawalan suhu yang berbeza, inkubator makmal digunakan untuk bidang yang berbeza. Thchamber mempunyai inkubator biokimia, digunakan secara meluas untuk jabatan penyelidikan dan pengeluaran seperti perlindungan alam sekitar, sanitasi dan pencegahan wabak, pertanian, ternakan dan produk akuatik, ujian dadah, kultur sel, dll.